玻璃微電極是膜片鉗系統(tǒng)通過探頭直接與細(xì)胞膜封接的部件。微電極一般是用不同的玻璃毛坯管拉制而成。玻璃毛坯管從材料方面來劃分,可有兩類,即軟玻璃(如蘇打玻璃、電石玻璃)和硬玻璃(如硼硅玻璃、鋁硅玻璃、石英玻璃等)。
膜片鉗系統(tǒng)電極拉制:
PP-830電極拉制儀是一種垂直式控制儀,利用金屬絲通過大電流是玻璃管加熱到熔點(diǎn),利用重力拉斷。首先將玻璃軟化,拉長一個短距離(0.7-10mm)使玻璃管變細(xì);隨后用較小的電流對玻璃管加熱作第二次拉伸,使玻璃管分成對稱的兩半。
電極涂敷和電極拋光:
為了提高玻璃電極與細(xì)胞的封接成功率,常常需要對拉制成功的電極尖端作進(jìn)一步的處理。電極涂敷是在電極尖端末梢前10-20μm處涂敷一層疏水材料硅酮樹脂(Sylgard),隨后立即作接熱處理。涂敷硅酮樹脂能防止液膜爬上電極,目的是為了減小電極內(nèi)部與溶液之間的電容。需要注意的是,涂敷處理要在最后熱拋光之前進(jìn)行,以便熱量蒸發(fā)或燒掉由于涂敷過程所留下的殘余物。熱拋光的處理時,在具有400-800x的顯微鏡下,先將加熱絲通電至通紅,然后移動加熱絲或電極使二者靠近,直至電極尖端開始熔化并達(dá)到所需的尺寸。熱拋光處理的方法是電極尖端光滑、周圍均勻,促進(jìn)電極尖端與細(xì)胞膜的封接。
膜片鉗系統(tǒng)電極夾持器:
電極夾持器一端插入玻璃微電極,內(nèi)裝Ag/AgCl電極絲,它與放大器的探頭通過BNC連接器插接,它既有良好的電氣絕緣性,又有良好的屏蔽性和機(jī)械堅固性。電極夾持器有兩種基本功能:一是將電極內(nèi)液與BNC連接器的引腳在電氣方面連接;另一則是便于對電極內(nèi)腔施加正、負(fù)壓力。